裸藻源β-1,3-葡聚糖是被廣泛認(rèn)可的高效免疫調(diào)節(jié)劑，它可以提升動(dòng)物機(jī)體免疫力，在人和動(dòng)物中都有很好的推廣和應(yīng)用，研究成果也在不斷推陳出新。2022年底在國(guó)際知名獸醫(yī)雜志Open Veterinary Journal發(fā)表了一篇其在豬上的研究成果，題目和作者見(jiàn)圖1。題目簡(jiǎn)單地說(shuō)明了β-葡聚糖對(duì)非洲豬瘟病毒的影響，從文中材料與方法可知其葡聚糖為線性裸藻源β-1,3-葡聚糖。本篇譯文將挑選幾項(xiàng)重點(diǎn)研究結(jié)果，以饗讀者。
圖1 β-葡聚糖的免疫效果研究發(fā)表文章題目截圖
01目的
在這項(xiàng)研究中，作者以豬肺泡巨噬細(xì)胞（PAM）模型研究裸藻源β-1,3-葡聚糖對(duì)PAM活力的作用效果。
02材料與方法
為評(píng)估裸藻源β-1,3-葡聚糖對(duì)豬肺泡巨噬細(xì)胞的潛在影響， 本研究采用MTT比色法評(píng)估裸藻源β-1,3-葡聚糖對(duì)免疫細(xì)胞增殖的影響。
收集豬肺泡巨噬細(xì)胞，通過(guò)血細(xì)胞計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)，使用培養(yǎng)基對(duì)原代肺泡巨噬細(xì)胞進(jìn)行稀釋?zhuān)辜?xì)胞濃度為106個(gè)/ml。
將該細(xì)胞懸液用100μl移液器均勻分配到96孔微量滴定板中，并在5%CO2中孵育24小時(shí)，培養(yǎng)溫度為37°C。
用0μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖(對(duì)照組)、30μg/ml 裸藻源β-1,3-葡聚糖和50μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖預(yù)處理肺泡巨噬細(xì)胞2小時(shí), 然后使用103HAD50/ml的越南非洲豬瘟病毒（ASFV）HN02毒株攻毒。
在5%CO2、37°C條件下孵育24、48、72、96和120小時(shí)，使用MTT試劑盒測(cè)定細(xì)胞增殖結(jié)果，通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR進(jìn)一步檢測(cè)裸藻源β-1,3-葡聚糖對(duì)越南分離的田間ASFV毒株的潛在影響。
使用夾心酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法檢測(cè)裸藻源β-1,3-葡聚糖誘導(dǎo)的干擾素（IFN）-α和白細(xì)胞介素（IL）-6的濃度。
03結(jié)果與討論
3.1裸藻源β-1,3-葡聚糖能促進(jìn)豬肺泡巨噬細(xì)胞的活力
用30和50μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖預(yù)處理豬肺泡巨噬細(xì)胞2小時(shí)，對(duì)照組未加入裸藻源β-1,3-葡聚糖處理，然后使用103HAD50/ml的越南非洲豬瘟病毒（ASFV）HN02毒株攻毒，在5%CO2 在37°C條件下孵育24、48、72、96和120小時(shí)，用MTT試劑盒測(cè)定細(xì)胞增殖，結(jié)果如圖2所示。
圖2 MTT比色法測(cè)定β-1,3-葡聚糖對(duì)PAM細(xì)胞活力的影響
圖表來(lái)源：Open Veterinary Journal,2022
結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，30或50μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖處理組能夠以劑量依賴(lài)性方式提高細(xì)胞存活率，并且這些效果一直持續(xù)到120小時(shí)。
3.2裸藻源β-1,3-葡聚糖對(duì)豬肺泡巨噬細(xì)胞有免疫增強(qiáng)作用
使用30μg/ml和50μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖預(yù)處理 PAM 2小時(shí)后，暴露于103HAD50/ml ASFV 持續(xù) 12、24小時(shí)。
收集上清液，然后對(duì)ASFV的DNA p72基因進(jìn)行實(shí)時(shí)PCR擴(kuò)增，檢測(cè)裸藻源β-1,3-葡聚糖處理的PAM中病毒DNA的拷貝數(shù)，結(jié)果如圖3所示。
與對(duì)照組相比，使用裸藻源β-1,3-葡聚糖處理的PAM感染12小時(shí)后的病毒滴度顯著降低。
圖3 裸藻源β-1,3-葡聚糖對(duì)PAM抗病毒活性的影響
圖表來(lái)源：Open Veterinary Journal,2022
3.3高劑量的裸藻源β-1,3-葡聚糖顯著增強(qiáng)了病毒感染后PAM中IFN-α和IL-6的產(chǎn)生
用30μg/ml和50μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖預(yù)處理PAM 2小時(shí)并設(shè)立對(duì)照組，然后暴露于103HAD50/ml ASFV病毒條件下，持續(xù)12小時(shí)（A、C）和24小時(shí)（B、D）產(chǎn)生的細(xì)胞因子IFN-α和IL-6如圖4。
圖4 裸藻源β-1,3-葡聚糖處理PAM后感染ASFV產(chǎn)生細(xì)胞因子的濃度對(duì)比
備注:
A:12小時(shí)IFNα濃度（pg/mL）
B:24小時(shí)IFNα濃度（pg/mL）
C:12小時(shí)IL-6濃度（pg/mL）
D:24小時(shí)IL-6濃度（pg/mL）
圖表來(lái)源：Open Veterinary Journal,2022
與對(duì)照組相比，裸藻源β-1,3-葡聚糖（30μg/ml和50 μg/ml）兩個(gè)處理組在12h時(shí)IFN-α和IL-6的產(chǎn)生均顯著增加，并持續(xù)到24h。
高劑量的裸藻源β-1,3-葡聚糖顯著增強(qiáng)了感染后PAM中IFN-α和IL-6的產(chǎn)生。
04結(jié)論
本研究結(jié)果揭示了裸藻源β-1,3-葡聚糖對(duì)ASFV的影響，其作用機(jī)制可能與細(xì)胞免疫反應(yīng)有關(guān)，且對(duì)裸藻源β-1,3-葡聚糖存在劑量依賴(lài)作用。
此外，研究還表明，裸藻源β-1,3-葡聚糖可以顯著提升宿主免疫力。
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