題目：后備母豬PRRSV血清馴化
摘要：
馴化方案包括血清暴露和恢復(fù)兩個(gè)步驟。陰性后備母豬在到達(dá)后第5天肌注選定動(dòng)物的血清。在實(shí)施后備母豬血清馴化1年后，母豬群血清陽(yáng)性率顯著降低(P＜0.05)。所有保育豬均為PRRSV陰性。ELISA結(jié)果顯示，在完全獨(dú)立的育肥場(chǎng)PRRSV陽(yáng)性率顯著降低(P＜0.05)，所有豬只在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)均為陰性。在部分獨(dú)立的育肥場(chǎng)，出現(xiàn)了持續(xù)的血清轉(zhuǎn)化(P＞0.05)。綜上所述，后備母豬血清馴化實(shí)現(xiàn)了母豬群的穩(wěn)定，確保繁殖場(chǎng)能生產(chǎn)陰性斷奶豬，使PRRSV做到完全根除。
研究豬群位于墨西哥索諾拉，由5000頭母豬組成的多地點(diǎn)生產(chǎn)系統(tǒng)。保育場(chǎng)和育肥場(chǎng)位于繁殖場(chǎng)幾英里遠(yuǎn)的地方。每個(gè)保育場(chǎng)能夠存放4000頭仔豬，按1個(gè)生產(chǎn)組計(jì)算。
為了實(shí)現(xiàn)相互獨(dú)立，每一個(gè)生產(chǎn)組豬只從保育場(chǎng)轉(zhuǎn)移到育肥場(chǎng)(距離保育場(chǎng)＞3英里)。這個(gè)生產(chǎn)系統(tǒng)只包括了80%的場(chǎng)被歸類(lèi)為完全獨(dú)立的。另外20%的場(chǎng)為未完全獨(dú)立，因?yàn)楸Ｓ龍?chǎng)和育肥場(chǎng)位于相同的位置，共享相同的區(qū)域和人員。
該生產(chǎn)系統(tǒng)自1994年以來(lái)就感染了PRRSV。在保育豬和育肥豬中觀察到與PRRSV感染相關(guān)的繁殖和呼吸癥狀以及死亡率的增加。血清學(xué)證實(shí)了藍(lán)耳病病毒的存在。在最初爆發(fā)后的母豬群中，母豬反復(fù)感染很明顯。
1999年，豬場(chǎng)開(kāi)始了一項(xiàng)后備母豬馴化計(jì)劃，包括從保育豬和育肥豬中進(jìn)行血清馴化。在開(kāi)始馴化前和馴化過(guò)程中，母豬群接種了丹毒、細(xì)小病毒、鉤端螺旋體和肺炎支原體疫苗。
馴化方案包括將母豬暴露在感染環(huán)境中，然后再讓其逐漸康復(fù)，當(dāng)后備母豬被引入母豬群時(shí)，先進(jìn)行馴化，防止PRRSV感染和擴(kuò)散，從而進(jìn)一步控制保育和育肥豬群中藍(lán)耳病的流行。
馴化單元被安置在一個(gè)獨(dú)立的地方，遠(yuǎn)離母豬場(chǎng)。兩個(gè)通風(fēng)良好的豬舍用來(lái)飼養(yǎng)后備母豬，該單元實(shí)施全進(jìn)全出管理。每個(gè)更新組由350頭18至22周齡的后備母豬組成。每5周給母豬群轉(zhuǎn)一批后備母豬(計(jì)劃每年10批)。根據(jù)PRRSV排毒時(shí)間(9-11周多見(jiàn))和持續(xù)性時(shí)間長(zhǎng)的(12周)規(guī)律，母豬感染后至少在這個(gè)單位呆10周。
用生產(chǎn)上病弱的保育豬和育肥豬，作為PRRSV的來(lái)源。選擇的豬只日齡在8-12周齡之間，基于每月血清學(xué)調(diào)查(n=30)以及以前記錄的信息。
通過(guò)前腔靜脈抽取血液，并低速850×g離心10分鐘收集血清。添加了抗生素以避免污染。
PRRSV陰性后備母豬在到達(dá)后第5天每頭肌注1mL血清。馴化前5天和馴化后2周(19 d)分別飼喂添加藥物的飼料(600 ppm金霉素)。
在馴化后第0、35和63天對(duì)每個(gè)批后備母豬進(jìn)行血清學(xué)檢查，每批后備母豬的樣品量為30頭。這樣做是為了確定馴化結(jié)果和馴化結(jié)束時(shí)的恢復(fù)狀況。采用血清樣本采用ELISA進(jìn)行檢測(cè)，每日進(jìn)行臨床觀察(發(fā)熱和檢測(cè))。采用重復(fù)測(cè)量方差分析(ANOVA)對(duì)后備母豬平均S:P進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
在感染后35天，后備母豬血清轉(zhuǎn)化，S/p值≥0.4，如圖1所示。平均S/P值在第35天比第0天有所增加(P＜0.05)。平均S/P值在第63天與感染后35天相比沒(méi)有顯示出顯著的降低(P＞0.05)。
每4個(gè)月對(duì)繁殖群(n=80頭)、保育豬(n=20頭)和育肥豬(n=20-30頭)進(jìn)行一次血清學(xué)檢查。在繁殖群中，包括所有胎次的母豬。
在育肥豬中，進(jìn)行血清學(xué)評(píng)估時(shí)考慮了生產(chǎn)流程，對(duì)完全獨(dú)立場(chǎng)和未完全獨(dú)立場(chǎng)分別進(jìn)行了一個(gè)單獨(dú)的血清學(xué)分析。
母豬群的血清學(xué)評(píng)估，如圖2所示。統(tǒng)計(jì)分析ELISA陽(yáng)性率。血清學(xué)檢測(cè)陽(yáng)性率降低(P＜0.05)。在母豬馴化計(jì)劃實(shí)施后，觀察到明顯的血清學(xué)穩(wěn)定，顯示大約20%的PRRSV陽(yáng)性豬只血清陽(yáng)性率下降。
如圖3所示，在母豬馴化計(jì)劃開(kāi)始時(shí)，保育豬中血清陽(yáng)性率高。計(jì)劃開(kāi)始后，豬只血清陽(yáng)性率明顯下降。
在未完全獨(dú)立的育肥豬中觀察到持續(xù)的血清轉(zhuǎn)化，如圖4所示(P＞0.05)。相反，通過(guò)ELISA，完全獨(dú)立的育肥場(chǎng)中PRRSV陽(yáng)性豬只出現(xiàn)血清陽(yáng)性率降低(P＜0.05)(圖4)。
巴蒂斯塔等人描述了接種后第42天S/P比率的下降，并得出結(jié)論，大多數(shù)后備母豬不再有病毒血癥，可以轉(zhuǎn)移到妊娠區(qū)。在本研究中，平均S/P值在接種后63天沒(méi)有下降。在將后備母豬轉(zhuǎn)入母豬群后，才隨后觀察到抗體水平下降。
同樣，測(cè)序信息對(duì)于確認(rèn)是否為豬場(chǎng)特有的毒株至關(guān)重要。根據(jù)母豬群的血清學(xué)評(píng)估，可以推斷后備母豬管理方案防止了PRRSV在母豬群中的傳播和再循環(huán)，因?yàn)樵撊后w的S/P比值隨著時(shí)間的推移顯著下降。
圖1：母豬馴化血清學(xué)箱線圖
圖2：母豬群抗體陽(yáng)性頻率
-1:后備母豬馴化開(kāi)始前；0:后備母豬馴化開(kāi)始；1-9：每隔4個(gè)月進(jìn)行一次馴化
圖3：保育豬抗體陽(yáng)性頻率
-1:后備母豬馴化開(kāi)始前；0:后備母豬馴化開(kāi)始；1-9：每隔4個(gè)月進(jìn)行一次馴化
圖4：完全獨(dú)立場(chǎng)育肥場(chǎng)和未完全獨(dú)立場(chǎng)育肥場(chǎng)抗體陽(yáng)性頻率
-1:后備母豬馴化開(kāi)始前；0:后備母豬馴化開(kāi)始；1-9：每隔4個(gè)月進(jìn)行一次馴化
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